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空氣過濾網(wǎng)病毒過濾效率檢測評估流程詳解
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  • 2026-01-09

  病毒的強傳染性與微小粒徑對濾網(wǎng)的過濾精度、完整性提出嚴(yán)苛要求,通過專業(yè)空氣過濾網(wǎng)病毒過濾效率檢測可量化評估濾網(wǎng)對病毒氣溶膠的攔截效率、阻力變化及密封性能,不僅能為企業(yè)產(chǎn)品研發(fā)、質(zhì)量管控提供科學(xué)數(shù)據(jù)支撐,確保產(chǎn)品符合醫(yī)療、潔凈室等特殊場景的合規(guī)要求,還能幫助運維人員及時發(fā)現(xiàn)濾網(wǎng)破損、效率衰減等問題,避免因濾網(wǎng)失效導(dǎo)致空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)成為病毒傳播載體,保障系統(tǒng)穩(wěn)定運行與環(huán)境安全。


  病毒過濾效率是指在規(guī)定測試條件下,空氣過濾網(wǎng)對特定病毒株(如流感病毒H1N1、冠狀病毒SARS-CoV-2假病毒、腺病毒)的攔截能力,以“過濾后病毒滴度與過濾前病毒滴度的差值占原始滴度的百分比”表示,需同時滿足“氣溶膠載體攔截”和“病毒本身捕獲”雙重要求。


空氣過濾網(wǎng)病毒過濾效率檢測


  空氣過濾網(wǎng)病毒過濾效率檢測評估流程


  1:樣品準(zhǔn)備與預(yù)處理


  樣品裁剪:選取3個代表性濾網(wǎng)樣品,裁剪為100mm×100mm標(biāo)準(zhǔn)尺寸,確保無破損、無變形,邊緣用密封膠處理;


  無菌處理:將樣品放入無菌包裝袋,經(jīng)γ射線滅菌或環(huán)氧乙烷滅菌,去除樣品本身附著的微生物,避免干擾檢測結(jié)果;


  樣品平衡:將無菌樣品置于檢測環(huán)境中平衡24小時,確保樣品狀態(tài)與測試環(huán)境一致。


  2:病毒株選擇與制備


  病毒株選型:根據(jù)檢測需求選取代表性病毒(優(yōu)先選擇包膜病毒,如H1N1流感病毒ATCCVR-1469、SARS-CoV-2假病毒(避免活病毒風(fēng)險)、呼吸道合胞病毒RSV);


  病毒培養(yǎng):在生物安全柜內(nèi),將病毒接種至對應(yīng)宿主細(xì)胞(如MDCK細(xì)胞用于H1N1、Vero細(xì)胞用于冠狀病毒),置于37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72小時,獲得病毒原液;


  病毒滴度校準(zhǔn):采用空斑形成單位(PFU)法或TCID??法,將病毒原液稀釋至測試濃度(10?-10?PFU/mL),確保濃度穩(wěn)定。


  3:空白對照與陽性對照設(shè)置


  空白對照:不放入濾網(wǎng)樣品,僅通入不含病毒的氣溶膠載體,按后續(xù)流程采樣培養(yǎng),確認(rèn)檢測系統(tǒng)無微生物污染;


  陽性對照:不放入濾網(wǎng)樣品,通入制備好的病毒氣溶膠,采樣后培養(yǎng),確認(rèn)病毒活性正常。


  4:樣品安裝與病毒氣溶膠通入


  樣品安裝:將預(yù)處理后的濾網(wǎng)樣品固定于風(fēng)洞測試段,四周用無菌密封墊壓實,確保無漏風(fēng);


  病毒氣溶膠發(fā)生:啟動氣溶膠噴霧器,將病毒懸液(10?PFU/mL)以10mL/min的速率霧化,持續(xù)通入風(fēng)洞,同時開啟風(fēng)機(jī),保持風(fēng)速0.5m/s,讓病毒氣溶膠與濾網(wǎng)充分接觸。


  5:上下游病毒采樣


  采樣時機(jī):病毒氣溶膠通入10分鐘后開始采樣,確保氣流與病毒分布穩(wěn)定;


  采樣操作:上游、下游采樣器同時啟動,采樣流量設(shè)定為28.3L/min,采樣時間30分鐘;


  采樣后處理:采樣結(jié)束后,用5mL無菌生理鹽水沖洗采樣器收集瓶,獲得病毒洗脫液,立即密封并置于冰盒中保存。


  6:病毒滴度檢測


  梯度稀釋:將上下游病毒洗脫液分別進(jìn)行10倍梯度稀釋(10?1至10??),每個稀釋度設(shè)置3個重復(fù)樣;


  細(xì)胞接種:將稀釋后的病毒液分別接種至96孔細(xì)胞培養(yǎng)板,對應(yīng)的宿主細(xì)胞懸液每孔100μL,輕輕搖勻;


  培養(yǎng)孵育:將培養(yǎng)板置于37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中孵育72小時,觀察細(xì)胞病變(CPE)情況;


  滴度計算:采用Reed-Muench法計算病毒滴度(PFU/mL),取3個重復(fù)樣的平均值作為上下游病毒滴度(N?=下游滴度,N?=上游滴度)。


  7:病毒過濾效率計算


  按以下公式計算VFE:


  VFE(%)=(1-N?/N?)×100%


  示例:上游病毒滴度N?=5.2×10?PFU/mL,下游病毒滴度N?=2.1×103PFU/mL,則VFE=(1-2.1×103/5.2×10?)×100%≈99.59%;


  結(jié)果要求:每個樣品重復(fù)檢測3次,取平均值作為最終VFE,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)需≤5%。


  8:結(jié)果驗證


  對照驗證:空白對照需無細(xì)胞病變(CPE陰性),陽性對照病毒滴度需≥10?PFU/mL,否則檢測結(jié)果無效,需重新測試。


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